全自动梯度制备仪-南京医科大学大型仪器

BIOCOMP全自动梯度制备仪将密度梯度制备与分离检测整合于一台主机，实现从梯度生成、超速离心后条带识别到组分收集的全流程自动化。其核心特色在于专利倾斜管旋转制备技术，无需混合、冻融或层铺即可在2 min内生成完全线性的密度梯度，且一次可制备6–8支相同梯度溶液，重复性极佳。分离模块采用专利Trumpet-Tip™喇叭状吸头，以步进马达精确控制下压吸取，将样品条带从水平层平稳转移至垂直细柱，最大程度减少层流毛细管扰动，避免传统针头穿刺带来的条带混淆、分散层流和拖尾现象。系统标配可见光散射条带可视系统（20 W卤素灯/LED光源），可实时观察病毒、核糖体等微小颗粒的分离效果；配合三通道紫外/荧光检测器与馏分收集器，可在线绘制260 nm/280 nm吸收图谱并自动收集目标组分。软件支持梯度程序编辑、数据叠加、实时信号显示及Excel/图片格式导出，并具备自动清洗与干燥功能，有效消除样本间交叉污染。该设备广泛应用于病毒纯化、亚细胞器分离、蛋白质与核酸纯化、碳纳米管分离及多聚核糖体/外泌体富集等领域。

1. 梯度制备原理：采用专利倾斜管旋转法（tilted tube rotation），将两种端点溶液直接置于离心管中，通过设定角度与转速自动混匀形成线性梯度。

2. 制备参数：转盘倾斜角度0.0–90.0°（从垂直位开始），转速0–60 RPM，离心时间0–9:59（min:sec）/0–99.9 min/0–999 min三档可调。

3. 制备通量：最快约1–2 min内同时完成6个（或8个）离心管样品的均一线性梯度制备。

4. 分离系统：步进马达推动下压式喇叭状吸头（Trumpet-Tip™），步进速度0.2–6.5 mm/sec，分辨率10 μm，分离精度>99%，重复性0.01 mm。

5. 检测系统：标配三通道检测器，可选紫外260 nm、280 nm及荧光通道（EGFP、Cy3、Cy5等）；光源为LED，寿命约30,000 h，无需预热。

6. 收集系统：馏分收集器支持60×1.5 mL Eppendorf管，组分个数1–99个条带/段子程序，10段子程序/全过程。

7. 程序存储：内置20个自动运行程序，每个程序由10段子程序组成；具备记忆功能，自动记忆最近使用的10种梯度制备程序。

8. 兼容介质：适用于蔗糖、甘油、Optiprep®、Nycodenz®、Ficoll®、Percoll®、Metrizamide、Renografin®、NaCl、CsCl、NaAc及KCl等十余种梯度介质。

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上机前须根据目标分子密度预先配制两种端点浓度溶液（如5%与30%蔗糖），确保溶液澄清无气泡，并使用配套离心管及磁性管架（Magnabase™）固定于转盘；制备前需用水平仪确认主机平衡，防止旋转时失衡。梯度制备完成后应尽快进行超速离心，离心管需严格配平并对角放置于转子中。分离阶段须选择匹配的管架与Trumpet-Tip™吸头，安装前确认吸头洁净干燥；上样前以MilliQ水灌注管路并Prime泵体，执行Zero OD基线校正。分离过程中建议开启Meniscus Sensing（弯月面感应）功能，以精确定位条带起始位置；收集体积与组分个数应根据预实验条带分布合理设定，避免过度切割导致交叉污染。每次分离结束后必须执行自动清洗程序（水或缓冲液冲洗+吹干），管路及吸头须彻底干燥后方可进行下一轮实验。紫外检测池应定期清洁，若信号基线漂移需重新调零；卤素灯/LED光源无需预热但应避免长时间空载运行。实验数据须及时通过配套软件导出备份，禁止私自修改系统程序或梯度参数；操作人员须接受培训后方可独立使用，日常维护需定期以标准品验证分离精度与回收率。

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