数字PCR仪-南京医科大学大型仪器

该仪器采用数字PCR（dPCR）技术，通过将样本分割为数万个独立微反应单元实现单分子水平的绝对定量，完全摆脱传统qPCR对Ct值和标准曲线的依赖，尤其适用于靶基因微小表达差异及低丰度序列的检测。系统提供三种纳米孔芯片配置——高灵敏度20,000分区板针对cfDNA、肿瘤稀有突变检测；通用28,000分区板适用于基因表达、绝对定量及移植排斥监测；高分辨率100,000分区板专为拷贝数变异（CNV）、无创产前检测（NIPT）和人类遗传病设计。其核心特色在于6+1色荧光通道带来的高阶多重检测能力、5×浓缩预混液提供的高样本体积利用率，以及惰性硅油分区技术带来的低污染与高重复性；配合"一步加样"的简易工作流程和全自动化样本-信息流追踪，显著减少人为操作误差。软件系统既可按需灵活分析，又符合21 CFR Part 11及LIS对接标准，兼顾科研探索与临床合规需求，在肿瘤MRD监测、液体活检和遗传病诊断等领域具有显著优势。

1. 检测原理：基于纳米孔芯片（nanowell）的数字PCR（dPCR）技术，通过单分子分区实现核酸绝对定量，无需标准曲线及Ct值。

2. 分区引擎：独立模块尺寸约25 cm×25 cm×30 cm，触摸屏操作，使用惰性非挥发性硅油作为分区流体，降低污染风险并支持多房间配置。

3. 纳米孔芯片：标准SBS/96孔板格式（85 mm×128 mm，8条样本通道/板），提供三种配置——高灵敏度板约20,000个分区（166×87×160 μm，~45 μL）、通用板约28,000个分区（121×62×128 μm，~30 μL）、高分辨率板约100,000个分区（54×27×75 μm，~15 μL）。

4. 光学检测：分析仪配备6个高级荧光检测通道+1个专用参考通道，支持高阶多重检测。

5. 温控与成像：分析仪集成热循环与密封板内分区成像，尺寸约90 cm×90 cm×60 cm。

6. 样本通量：每批次以8个样本为增量，可灵活处理1–96个样本；12块板容量，1–6块板运行最长约3.5小时，7–12块板最长约5小时。

7. 反应体系：配套5×浓缩DNA/RNA预混液，允许更高样本体积输入，提升低丰度靶标检测效率。

8. 性能指标：最佳输入条件下定量精度≤5%、偏差±10%；线性动态范围≥4个数量级；高分辨率板可区分10%拷贝数差异，通用板最低检测限（LoD）达0.1% MAF。

9. 死体积控制：20,000/28,000分区板平均死体积约10%，100,000分区板仅约5%。

10. 软件合规：配备开发及分析软件包，支持LIS系统对接，符合21 CFR Part 11要求，具备审计追踪功能。

暂无内容

上机前须确认样本为已提取的高质量DNA或RNA，避免使用含PCR抑制剂的粗提物或未经纯化的样本；反应体系须根据所选芯片类型严格匹配体积（高灵敏度板~45 μL、通用板~30 μL、高分辨率板~15 μL），并使用配套5×浓缩预混液按推荐比例配制。加样前须将反应液充分涡旋混匀并短暂离心去除气泡，确保每条样本通道加样准确且无泄漏；芯片加载至分区引擎后由硅油自动完成微孔填充，操作全程应避免交叉污染，芯片一旦密封严禁打开。对于低丰度样本（如cfDNA、稀有突变），建议设置技术重复并选用对应高灵敏度芯片，确保突变等位基因频率高于平台最低检测限（0.1%–0.2% MAF）。运行结束后，纳米孔板为一次性密封耗材，应按生物危害废物处理；日常维护需定期使用标准品执行系统性能验证，确认分区完整性、光学通道灵敏度及温控均一性。数据须及时通过配套软件导出备份，禁止私自修改系统配置或分析算法参数，确保实验结果的可追溯性与合规性。

暂无内容

仪器列表Instrumentation

仪器列表

江宁校区

数字PCR仪